Квантифероновый тест

Квантифероновый тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) — это современный лабораторный тест, который позволяет выявить туберкулез в латентной (скрытой) и активной стадии.

* принимаем анализ ежедневно по предварительной записи

Квантифероновый тест - диагностика туберкулёза

Туберкулез – опасное инфекционное заболевание, вызванное микобактериями туберкулеза. Микобактерии туберкулеза могут поражать все органы и системы организма, чаще страдают органы дыхания, поэтому выделяют две формы туберкулеза: лёгочная и внелёгочная.

При лёгочной форме поражаются лёгкие и бронхи, при внелёгочной форме: пищеварительная система (чаще дистальный отдел тонкого кишечника и слепая кишка); мочеполовая система (почки, мочевыводящие пути, половые органы у женщин: матка, трубы, придатки, у мужчин: простата, яички); нервная система (головной, спинной мозг); опорно-двигательная система (кости, чаще поражается позвоночник, суставы); кожа, глаза и др.

Основной путь передачи бактерии туберкулеза, является воздушно-капельный, который осуществляется при разговоре, кашле или чихании больного человека, именно этот путь заражения приводит к лёгочной форме туберкулеза.

Чаще всего после инфицирования заболевание протекает латентно (скрыто), и лишь у некоторых, при определенных изменениях в организме переходит в активную стадию.

Своевременная диагностика туберкулеза — это единственная возможность не допустить перехода латентной стадии заболевания в активную у инфицированных людей, и защитить здоровых людей от инфицирования, путем выявления зараженных.

Разберем по полочкам скрининговые специфические методы диагностики туберкулеза: на сегодняшний день существует 2 группы.

  • 1 группа — это кожные тесты, сюда относится проба Манту и Диаскин тест.
  • 2 группа — это IGRA-тесты, лабораторные исследования туберкулеза по крови человека, к ним относятся ТОЛЬКО: Квантифероновый тест  и T-SPOT.TB (т-спот).

ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ! ПЦР диагностика туберкулеза не подходит для скрининга выявления туберкулеза, т.к. для этого метода необходим материал из ОЧАГА предполагаемого туберкулеза.

ПЦР крови на микобактерию туберкулеза, будет положительна при  туберкулезном сепсисе (заражение крови) и диссеминированном туберкулезе (самые тяжелые формы туберкулеза). В остальных случаях результат будет отрицательный, но это не означает, что человек не инфицирован туберкулезом.

ПЦР диагностика используется для быстрой диагностики открытых и закрытых форм туберкулеза, например у человека выставлен диагноз туберкулез легких, необходимо понять, опасен он для окружающих или нет, берется мокрота и определяется возбудитель в мокроте.

ПЦР положительная (рис.2) —  туберкулезная палочка выделяется при чихании, кашле, разговоре, зараженный человек представляет опасность для окружающих. ПЦР отрицательная (рис.1) — туберкулезный очаг не сообщается с бронхом, человек не выделяет туберкулезную палочку в окружающую среду, но при этом он заражен туберкулезом и нуждается в лечении!

Поэтому данный метод не используется для скрининговой диагностики туберкулеза, т.к. он не может исключить или подтвердить факт инфицирования туберкулезом.

Квантифероновый тест - диагностика туберкулёза

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА СКРИНИНГОВЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА

Реакция Манту Диаскин тест Квантифероновый тест T-SPOT.TB
Метод исследования Кожный тест Кожный тест Анализ крови из вены Анализ крови из вены
Побочные реакции Возможны Возможны Нет Нет
Противопоказания Есть Есть Нет Нет
Оценка результата Субъективная Субъективная Объективная объективная
Ложноположительный результат после  БЦЖ Часто Отсутствует Отсутствует Отсутствует
Выявляет стадию туберкулеза Активную Активную Латентную и активную Латентную и активную
Использование при беременности Запрещено Запрещено Разрешено Разрешено
Использование при острых заболеваниях Запрещено Запрещено Разрешено, но не рекомендуется, оптимально через 1 мес после выздоровления Разрешено, но не рекомендуется, оптимально через 1 мес после выздоровления
Во время карантина Запрещено Запрещено Разрешено Разрешено
Цена Бесплатно в поликлинике Бесплатно в поликлинике 4950 рублей 5990 рублей

СРАВНЕНИЕ КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА И Т-СПОТ

Квантифероновый тест, также как и T-SPOT относится к IGRA-тестам (interferongammareleaseassay), главное различие в том, что квантифероновый тест определяет гамма-интерферон из сенсибилизированных  Т-лимфоцитов, а Т-СПОТ определяет сами сенсибилизированные Т-лимфоциты, которые вырабатывают гамма-интерферон на рекомбинантные протеины  ESAT-6 и CFP-10, в крови у инфицированного микобактериями туберкулеза человека.

Диагностический тест T-SPOT.TB Квантифероновый тест
Срок исполнения 1-2 рабочих дня 1-3 рабочих дня
Методика исследования основана на стимуляции Т-клеток пептидами ESAT-6 и CFP-10 антигенов Ложноположительные результаты на БЦЖ-вакцинацию отсутствуют Ложноположительные результаты на БЦЖ-вакцинацию отсутствуют
Оценка результата Определяется количество сенсибилизированных Т-лимфоцитов, выделяющих  гамма-интерферон на ESAT-6 и CFP-10 антигены Определяется сам гамма-интерферон из сенсибилизированных Т-лимфоцитов на стимуляцию пептидными антигенами ESAT-6 и CFP-10
Стандартизация по количеству лимфоцитов Есть Нет
Дифференциация между латентной и активной стадией туберкулеза Нет Нет
Влияние принимаемых лекарственных препаратов на тест Нет Есть
Точность при иммуносупрессии (в т.ч. ВИЧ) Высокая Высокая, но могут быть ложноотрицательные результаты при выраженном снижении лимфоцитов
Чувствительность теста от возраста пациента Практически не изменяется Снижается после 30 лет
Применение у детей Ограничений нет Рекомендован с  5 лет
Материал для исследования Венозная кровь Венозная кровь
Подготовка к исследованию Не требуется. Взятие крови проводится натощак или не ранее, чем через 4 часа после необильного приема пищи. Допустимо пить чистую неминеральную и негазированную воду. Чай, кофе, сок запрещаются. Не требуется. Взятие крови проводится натощак или не ранее, чем через 4 часа после необильного приема пищи. Допустимо пить чистую неминеральную и негазированную воду. Чай, кофе, сок запрещаются.

ПРИНЦИП КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:

Квантифероновый тест - диагностика туберкулёза

ПОКАЗАНИЯ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Квантифероновый тест - диагностика туберкулёза

  1. Профилактическое обследование детей с 5 лет, посещающие детские сады и учебные учреждения.
  2. В случае противопоказания проведения кожных тестов: аллергические заболевания, кожные заболевания, эпилепсия, острые заболевания и обострение хронических;
  3. В случае токсико-аллергических реакций на туберкулин, который входит в пробу Манту;
  4. У детей, привитых БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту;
  5. У людей, посетивших страны с высоким уровнем заболеваемости туберкулёзом (Африка, Азия);
  6. Обследование беременных в случае контакта с больным туберкулёзом или наличия симптомов;
  7. У лиц, контактирующих с туберкулёзными больными;
  8. У пациентов на ФНО-ɣ терапии;
  9. У ВИЧ-инфицированных;
  10. При подозрении на внелёгочные формы туберкулёза.

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ является альтернативой пробе Манту, согласно клиническим рекомендациям, утвержденным Российским обществом фтизиатров и Министерством здравоохранения РФ, «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях» (Москва, 2017 г.; стр. 14) 

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЕЙ ЗАМЕНИТЬ НА T-SPOT.TB, ЕСЛИ:

  1. пациент принимает препараты угнетающие выработку гамма-интерферона (глюкокортикоиды);
  2. пациент принимает препараты снижающие уровень лейкоцитов: группа НПВС (аспирин, парацетамол, найс, кеторол и др.), цитостатики и т. д.;
  3. пациент с выраженным иммунодефицитом связанным со снижение уровня лимфоцитов, в том числе ВИЧ-инфекция;
  4. пациент до 5 лет и в пожилом возраст;

так как это позволит избежать ложноотрицательных результатов, тем самым не даст пропустить заражение туберкулезом. Во всех остальных случаях Квантифероновый тест не уступает T-SPOT.TB и дает такую же надежность и информативность.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА

Положительный Сомнительный/Неопределенный Отрицательный
  • Инфицирование микобактериями туберкулеза
  • Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. Marinum)

!!! необходима консультация фтизиатра!!!

Сомнительный результат,  требует контрольного исследования через 4-8 недель, может отражать начальный этап зараженияНеопределенный результат связан с недостаточной функциональной активностью Т-лимфоцитов. Рекомендовано повторить исследование через 2-4 недели.
  • Отсутствует заражение микобактерией туберкулеза
ЛОЖНООТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ :

  • недавнее инфицирование;
  • пациент до 5 лет, либо пожилой;
  • выраженный иммунодефицит;
  • прием лекарственных препаратов снижающих уровень лейкоцитов и/или блокирующий выработку гамма-интерферона.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

Шушакова Екатерина Константиновна

ПРИМЕРЫ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.

7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M.

bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.

В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание.

При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).

К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).

Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.

Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

  • Индивидуальная непереносимость туберкулина;
  • Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
  • Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
  • Период карантина в детских коллективах.

У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.

Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции

Параметр Проба Манту Диаскинтест® Квантифероновый тест
Метод исследования Кожный тест Кожный тест Исследование крови
Побочные реакции Возможны Возможны Нет
Противопоказания Есть Есть Нет
Специфичность Низкая Высокая Высокая
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ Да Нет Нет
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок Да (не ранее чем через месяц) Да (не ранее чем через месяц) Нет
Интерпретация результатов Субъективна Субъективна Объективна

Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:

  • отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
  • отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
  • безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
  • интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
  • высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).

Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:

  • Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
  • Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
  • Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
  • Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
  • Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
  • Обследование иммигрантов.

Пример результата исследования и интерпретация:

Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный. 

Параметр Результат Критерии оценки результатов
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) 0,05 До 8,00
Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) 0,09 Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL)
Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) 9,56 От 0,50
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) Отрицательный Отрицательный

Интерпретация результатов QFT: 

Отрицательный — вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует. 

Положительный — инфекция M.tuberculosis complex вероятна. 

Сомнительный — в силу чувствительности к TB-антигену.

Интерпретация результата исследования

Положительный результат Сомнительный результат Отрицательный результат
  • Инфицирование МБТ;
  • Инфицирование нетуберкулезными микобактериями (M. kansasii, M. szulgai, M. marinum).
  • Индивидуальные особенности иммунитета; 
  • Нарушение преаналитических требований.

В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований.

  • Не исключает инфицирования МБТ или туберкулеза.

Ложноотрицательные результаты могут быть:

  • В ранние сроки инфицирования;
  • При иммунодефицитных состояниях;
  • У детей < 5 лет;
  • При несоблюдении преаналитических требований.

Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.

  • Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.
  • Материал для исследования: кровь (специальный комплект из трех пробирок, который используется только для проведения исследования «Квантифероновый тест»).
  • Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.
  • Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).
  • В лабораторию CMD доставляются все 3 пробирки, помещенные в пакет «Комплект пробирок для Квантиферонового теста»!

Квантифероновый тест QuantiFeron-TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции (QuantiFERON-TB Gold, QFT) — узнать цены на анализ и сдать в Москве

Метод определения Твердофазный иммуноферментный анализ.

Исследуемый материал Цельная кровь (литий-гепарин)

Доступен выезд на дом

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Активный туберкулез развивается приблизительно у 10% людей, инфицированных M. tuberculosis.

В остальных случаях благодаря иммунной системе происходит элиминация возбудителя из организма или развивается латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).

При ЛТИ микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания. 

Диагностика активного туберкулеза основывается на изучении клинических и радиографических данных в совокупности с результатами прямого микроскопического исследования, выделения культуры Mycobacterium tuberculosis, ПЦР-исследований. 

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии. 

В настоящее время существуют два метода выявления вероятной латентной инфекции: 

  • in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест); 
  • in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты). 

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента. 

В соответствии с клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях (2017), квантифероновый тест является альтернативным внутрикожным пробам методом обследования на туберкулезную инфекцию. 

Квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) основан на измерении продукции INF-γ (гамма-интерферона).

Выработка гамма-интерферона осуществляется сенсибилизированными Т-клетками крови пациента, стимулированными in vitro специфическими для микобактерий туберкулеза антигенами: кодируемые регионом RD 1 (region of difference) – ESAT-6 (early secreted antigenic target – ранний секретируемый антиген), CFP-10 (culture filtrate protein – белок клеточного фильтрата) и пептид, кодируемый RD 11 – TB7.7 (p4). Указанные антигены отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий (за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), чем достигается высокая специфичность показаний теста. 

Преимущества исследования: 

  • высокая специфичность и чувствительность; 
  • отсутствие противопоказаний; 
  • отсутствие побочных реакций; 
  • результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG. 
  • Ограничения исследования: 
  • квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез; 
  • величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный; 
  • не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ. 

Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. Специфичность и чувствительность данного метода не достигает 100% и может варьировать у пожилых людей, детей младше 5 лет и лиц с иммунодефицитом.

  1. Васильева Е.В., Лапин С.В., Блинова Т.В., Никитина И.Ю., Лядова И.В., Вербов В.Н., Тотолян А.А. Сравнительная ценность квантиферонового теста, неоптерина и специфических противотуберкулезных антител для клинико-лабораторной диагностики туберкулеза легких. Клиническая лабораторная диагностика. 2013;5:21-26. 
  2. Клинические рекомендации «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях». 2017:33. 
  3. Корнева Н.В., Старшинова А.А., Овчинникова Ю.Э., Потапенко Е.И., Якунова О.А., Довгалюк И.Ф. Иммунологические показатели при различной активности туберкулезной инфекции у детей. Медицинская иммунология. 2014;16(5):425-430. 
  4. Кривохиж В.Н., Королюк А.М. Латентная туберкулезная инфекция у детей: диагностика, лечение, наблюдение. 2016:562-564. 
  5. Мордовская Л.И., Аксенова В.А., Владимирский М.А., Аксенова Е.И., Ефремов Е.Е., Власик Т.Н. Количественный анализ индукции интерферона γ клетками цельной крови IN VITRO в присутствии антигенов микобактерий туберкулеза. Педиатрия. 2009;88(5):43-46. 
  6. Новые технологии в диагностике туберкулеза: Квантифероновый тест (QuantiFERON®-TB Gold IT). Главный врач, фтизиатрия. 2013;1(32):55-58. 
  7. Толемисова А.М., Сидоренко О.А., Балмахаева Р.М., Бекбенбетова З.С., Смагулова Н.К. Квантифероновый тест в диагностике туберкулеза. Вестник КазНМУ. 2015;1:330-332. 
  8. Материалы фирмы-производителя реагентов (QIAGEN).

Иммунодиагностика туберкулеза: Т-Спот и Квантифероновый тест

  • После первичного контакта с микобактериями туберкулеза (инфицирования) болезнь может перейти на следующу стадию и тогда разовьется латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).
  • ЛТИ — это еще не болезнь, но ее наличие — фактор повышенного риска развитие активной формы туберкулеза (болезни).
  • Внешне это совершенно здоровые люди!
  • По оценкам, у 10% иммунокомпетентных лиц с ЛТИ й в течение жизни развивается туберкулез.
  • Примерно у половины этих людей заболевание туберкулезом развивается в течение первых двух лет после заражения,
  • У второй половины туберкулез может развиться в течение жизни.

Риск прогрессирования от туберкулезной инфекции к туберкулезному заболеванию повышается у лиц с ослабленной иммунной системой.

Задача скрининга на туберкулез — вовремя выявить эти 10% людей, у которых произошел переход от простого инфицирования к ЛТИ и назначить им профилактическое лечение, чтобы не допустить перехода к стадии болезни. Около 2 миллиардов человек в мире имеют ЛТИ, но только у 10 млн в год есть риск заболеть туберкулезом.

Проба Манту в скрининге и диагностике

Если вы внимательно прочитали статью про пробу Манту, то знаете, что туберкулин, применяемый для проведения пробы Манту — это смесь множества антигенов человеческих (M. tuberculosis) и бычьих (M.bovis) микобактерий, а вакцина БЦЖ — это пра-пра-правнучка M.bovis.

Сложив вместе эти два факта мы получаем основной недостаток пробы Манту:

она хорошо справляется с задачей динамического скрининга, но хуже подходит для сиюминутной диагностики, т.к. может давать (+) реакцию у большинства привитых БЦЖ

В странах, где нет массовой вакцинации БЦЖ, пробой Манту пользоваться гораздо удобнее, не только как скрининговым методом, но и диагностическим. Но вот беда — именно там она не нужна массово, т.к.

в этих странах совсем другой уровень заболеваемости туберкулезом и поголовный скрининг просто не нужен, только группам риска и то не везде. А там где массовый скрининг необходим (из-за высокой распространенности туберкулеза и высокого риска заражения) — всех прививают БЦЖ (ровно по той же причине).

В этих странах продолжает оставаться актуальным вопрос дифференцирования постВакцинальной и постИнфекционной чувствительности к туберкулину.

Еще один недостаток пробы Манту состоит в том, что с ее помощью мы чаще всего не можем провести границу между инфицированием и латентной туберкулезной инфекцией (ЛТИ).

Новая страница в истории

В начале 2000-х появилась новая технология иммунодиагностики туберкулеза — Interferon-gamma release assays (IGRAs) — “тест высвобождения гамма-интерферона”.

Для проведения такого теста требуется забор крови из вены и ее исследование в лаборатории под воздействием микобактериальных антигенов. По сути, мы добиваемся такой же реакции, как при проведении пробы Манту, только вне организма и с некоторыми важными отличиями:

1. В отличие от туберкулина, применяемого для проведения ПМ, в IGRA-тестах для активации лимфоцитов применяют смесь из нескольких ВЫБОРОЧНЫХ антигенов (2 или 3 шт, в зависимости от теста). Эти антигены были выбраны потому, что они не встречаются в вакцинных штаммах БЦЖ и не свойственны большинству неТуберкулезных микобактерий, но присутствуют у возбудителя ТБ человека (M. tuberculosis) и других микобактериях “туберкулезного комплекса” (M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti), потенциально патогенных для человека. 2. Еще одним важным отличием этих тестов от ПМ является то, что они выявляют реакции, присущие только лицам с наличием “активированного” инфекционного процесса начиная с ЛТИ, не затрагивая самую первую стадию — инфицирование. Представьте, что вы купили сим-карту и забыли про нее. Никто не знает, что она у вас есть. А если вы ее активировали и начали звонить с этого номера (не важно, один звонок был, или 1000), это уже можно отследить. Так же и тут.

Механизм работы IGRA-теста

✔️ В организме, в котором есть инфекционный ТБ процесс, вызванный M.tuberculosis, Т-лимфоциты под воздействием микобактериальных антигенов (МБА), специфических для этого возбудителя, начинают выделять гамма-интерферон (IFNγ).

✖️ В организме, где ТБ процесса нет, такой реакции НЕ БУДЕТ.

Эта методика не позволяет установить факт инфицирования. Только наличие “активированной” инфекции, начиная со стадии ЛТИ.

Чтобы эту реакцию “засечь”, нужно

  • — взять кровь пациента с жизнеспособными иммунными клетками
  • — выделить из нее лимфоциты
  • — добавить к ним МБА и оставить на какое-то время, чтобы произошла реакция
  • — посмотреть, начнут ли Т-лимфоциты выделять IFNγ

Т-спот — одна из разновидностей методики ELISpot

В россии доступно 2 вида igra-тестов:

  • QuantiFERON [Квантиферон] — рег.в РФ в 2010
  • T-SPOT.TB [Т-спот] — рег.в РФ в 2012

Хотя они и основаны на одном принципе, но имеют отличия в методике детекци:

✔️ T-SPOT — проводится подсчет количества КЛЕТОК, которые выделяют IFNγ. Подсчет ведут по окрасившимся “отпечаткам” лимфоцитов на дне лунки, где происходила инкубация.

✔️ QuantiFERON — определяют количество (концентрацию) IFNγ в исследуемом образце.

Когда я готовила этот материал у меня сложился пазл! Эта разница в методах заложена прямо в их названиях! Отпечатки = пятна = spot. А “Т” — это “Т-лимфоцит”. То есть T-SPOT = буквально “отпечаток Т-лимфоцита”. QuantiFERON — от “Quanti” — “количество” и “FERON” — интерферон

Еще одним важным отличием является точка контакта клеток крови с антигенами:

T-SPOT.TB — Забор крови производится в обычную пробирку. Ее доставляют в лабораторию и уже там проводят инкубацию с МБА.

QuantiFERON — при применении наборов последнего поколения (QuantiFERON Golg in Tube) pабор крови осуществляется в специальные пробирки (несколько штук), в которые УЖЕ содержат МБА, + пробирки с положительным и отрицательным контролем. Так что контакт с МБА начинается сразу.

Обратите внимание, что данные тесты не выявляют сами микобактерии как таковые, а только признаки их активности. А еще не дают ответа ГДЕ именно в организме (в легких, почках, кишечнике…), поэтому также как и кожные пробы должны оцениваться в комплексе с другими методами диагностики.

Плюсы igra-тестов

  1. ➕ Высокая специфичность и отсутствие перекрестной реакции у привитых БЦЖ
  2. ➕ Более объективная оценка результатов (в сравнении с кожными пробами)
  3. ➕ Не нужен отдельный визит к врачу для оценки результата, как при кожной пробе
  4. ➕ Подходит для лиц с абсолютными противопоказаниями к проведению кожных проб

Минусы igra-тестов

➖ Требуется забор крови из вены Для маленьких детей это является серьезным лимитирующим фактором. Для квантиферонового теста крови нужно МНОГО (3-4 пробирки). Для Т-спота — меньше (одна пробирка). Например, если родители против прививок и кожных тестов, то им нужно 2 раза в год брать у ребенка кровь из вены начиная с 6-месячного возраста…

➖ Стоимость Это очень дорогие исследования, и не только в России. На сегодня Квантифероновый тест в СПб с забором материала — 6000р, Т-спот 8000р. Для массового скрининга могут применяться только в странах с очень высоким уровнем дохода.

➖ Логистика — Температура транспортировки и хранения.

Как уже озвучила в описании методики, для выполнения анализа нужна кровь с живыми клетками! Нарушение температурного режима (+18- +25) может привести к тому, что материал будет испорчен и анализ недостоверен.

Для Т-Спот это принципиально, тк контакт с антигенами происходит уже после транспортировки. Это может привести к ложно-отрицательному результату! — Образцы крови должны быть проанализированы через 8-24 часов после забора (для T-spot — 32 часа).

➖ Специальное лабораторное оборудование, обученный персонал. Для проведения кожных проб не требуется специального оборудования, манипуляция осуществляется медицинским персоналом. Для проведения IGRA-тестирования требуется гораздо больше.

Поэтому в России существует всего порядка 50 лабораторий, которые могут самостоятельно их выполнять. В большинстве мест происходит только забор крови, а выполнение осуществляется по договору в другом месте, чаще в большой коммерческой профильной лаборатории в Москве..

Для родителя этот пункт не имеет большого значения, это, скорее, к вопросу доступности и соблюдения предыдущего пункта, если речь идет об удаленном от центра регионе.

Для стран с низким уровнем доходов рекомендации ВОЗ таковы:

“IGRA более дорогостоящий и технически сложный процесс, чем проба Манту. Учитывая сопоставимую производительность, но повышенную стоимость, замена пробы Манту на IGRA-тесты в качестве метода скрининга в условиях ограниченных ресурсов не рекомендуется.

Коммерческие IGRA-тесты одобрены FDA как косвенные и дополнительные тесты на инфекцию ТБ в сочетании с оценкой риска, рентгенографией и другими медицинскими и диагностическими оценками.

Существует несколько международных руководств по их использованию в странах с высоким уровнем дохода”. [1]

Что говорит по поводу IGRA-тестов Medscape?

▪️ Исследования, оценивающие показатели IGRA у детей, скудны.

▪️ Неопределенные результаты для детей являются потенциальным ограничением для внедрения IGRA в клиническую практику.

Частота неопределенных результатов IGRA у детей различна (диапазон 0–17%), и большинство из них связаны с низким уровнем реакции на стимуляцию микобактериальными антигенами в результате недостаточной иммунологической зрелости. Неопределенные результаты анализа QFT-InTube чаще встречаются среди детей младшегоо́возраста.

▪️ Трудности в сборе крови для этих анализов и потребность в относительно большом объеме крови у маленьких детей (особенно у младенцев) также являются ограничениями. [2]

Из инструкции к набору Т-Спот

Эффективность теста T-SPOT.TB не была адекватно оценена с образцами от лиц моложе 17 лет, у беременных женщин и у пациентов с гемофилией [3]. А ведь как правило желание сделать не Манту, а такой тест есть у родителей МАЛЕНЬКИХ детей.

Противопоказания

ОЧЕНЬ расстраивает информация из рунета, сильно искажающая сведения об этих тестах в позитивную сторону, и умалчивая о недостатках. Особенно бросается в глаза то, что у этих тестов якобы вообще нет противопоказаний и ничто не влияет на результаты теста. Как так? В организме влияет, а в пробирке не влияет? Клетки те же самые, только их достали.

В западных источниках информация больше похожа на правду. CDC рекомендует соблюдать не менее 4-6 недель интервала между живыми инъекционными вакцинами (КПК, Ветряная оспа) и проведением этого теста.

После перенесенной кори, краснухи, паротита и ветрянки, соответственно, тоже! Так что в случае плановой вакцинации живыми инъекционными вакцинами стОит делать забор крови до вакцинации либо в один день с прививкой.[3]

Выводы

IGRA-тесты — это не панацея. У них есть свои преимущества и свои недостатки. У них тоже бывают ложно(+) и ложно(-) результаты.

Это не полные аналоги пробы Манту (не выявляют стадию инфицирования) и маловероятно, что в ближайшее время в России или странах постсоветского пространства станут применяться в качестве метода скрининга ТБ. Только как дополнительный метод диагностики.

Хотя, благодаря локализации производства в России цена на T-SPOT.TB в ближайшее время может быть снижена, а тест станет доступен по ОМС для лиц с реальными противопоказаниями к проведению кожных проб. Приведу аналогию.

Если вам нужно просто перевезти из точки А в точку Б 100 человек, то оптимально будет нанять автобус. Если у вас 10 человек, то вам хватит маршрутки. А если нужно срочно доставить пострадавшего в больницу, то машина скорой помощи. Для разных задач разные решения являются лучшими.

Если я отказываюсь от проведения проб реакции Манту или Диаскин-теста моему ребенку, какие другие методы ранней диагностики туберкулеза в настоящее время имеются?

При отказе родителей ребенка от проведения внутрикожных проб на туберкулезную инфекцию, возможно назначение альтернативных методов обследования с целью исключения туберкулеза у ребенка.

К таким методам обследования относятся следующие диагностические тесты: квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) и тест T-SPOT.TB. В обоих случаях для проведения исследования осуществляется забор крови из вены.

Положительные результаты тестов указывают на активность туберкулезной инфекции и предполагают назначение дополнительного обследования для исключения локального туберкулеза.

Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. (с сайта правительства СПБ) [7]

1 Рекомендации ВОЗ по применению IGRA тестов в странах с низким уровнем доходов

2 Рекомендации MedScape про применению QuantiFERON-TB теста (QFT), QuantiFERON-TB Gold теста (QFT-G), QuantiFERON-TB Gold In-Tube теста (QFT-GIT), и T-SPOT.TB теста (T-Spot).

  • 3 T-SPOT.TB — инструкция по применению (оригинал)
  • 4 QuantiFERON-TB Gold Plus — описание метода (на русском)
  • 5 QuantiFERON-TB Gold Plus — Инструкция по применению (оригинал)
  • 6 Презентация ВОЗ о QuantiFERON-TB Gold Plus
  • 7 Какие методы исследования годятся, если я хочу отказаться от пробы Манту и Диаскинтеста? (Сайт правительства СПБ)

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock
detector